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原位末端凋亡(Tunel)
實驗原理
TUNEL技術(shù)可對組織或細(xì)胞中凋亡小體或單個凋亡細(xì)胞進(jìn)行染色,能準(zhǔn)確反映細(xì)胞凋亡最典型的生物化學(xué)和形態(tài)特征。凋亡細(xì)胞內(nèi)內(nèi)源性核酸內(nèi)切酶被激活而將自身染色體DNA切斷成缺口或3-OH末端片段這一特點,利用脫氧核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶將標(biāo)有標(biāo)記物(如地高辛,生物素或熒光素)的脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移到3-OH末端,再用免疫組化法或免疫熒光檢測凋亡細(xì)胞。
實驗流程
以石蠟包埋樣本為例: